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巴西稳稳的今年夺冠！不服来战！乌拉#梅西# #C罗#
体育大玩家No1
巴西队3-1克罗地亚 理查利森梅开二度 世界杯1/4决赛 FIFA23
03:40
今晚3关必中！！！
TtLPMO9E 和TtLPMO9G的生产和纯化：
解木质纤维素的微生物的分泌体含有大量酶，这些酶可以协同降解复杂、顽固和共聚的底物。LPMO编码基因和LPMO分别是许多此类转录组或分泌组的关键组成部分。本研究阐明了这些分泌蛋白组成员之间可能存在的新型相互作用和协同作用，即半纤维素分解LPMO和半纤维素修饰酶。先前对T. terrestris转录组的分析在三种不同的底物上生长，表明两种GH62阿拉伯呋喃糖苷酶基因之一在稻草生长期间高度上调。这样的发现证实了LPMO可能与自然界中的木聚糖脱支酶协同作用的假设。
我们相信，本研究揭示的LPMO和半纤维素脱支酶之间的联系可用于优化木质纤维素生物质的工业生物精炼，以生产可发酵糖或生物材料。众所周知，纤维素结合的顽固木聚糖会抑制纤维素分解酶的活性并增加木质纤维素材料的顽固性。
通过LPMO去除木聚糖可以改善随后的纤维素糖化，也可用于生产更清洁的基于纤维素纤维的生物材料。研究脱支酶对LPMO在木质纤维素分解混合物中的影响会很有趣。值得注意的是，这样做时，必须仔细考虑酶的剂量，因为过度的脱支可能会引发木聚糖聚集和/或促进木聚糖在纤维素上的过量纤维素酶抑制吸附。对各种植物细胞壁聚合物如何相互作用的更深入的分子水平理解将有助于此类努力。
解决与木质纤维素生物质的顽固性相关问题和建立经济上可行的生物精炼厂的关键在于优化使用裂解多糖单加氧酶。到目前为止，焦点主要集中在AA9家族LPMO及其在降解结晶纤维素中的作用。在本研究中，我们首次证明木聚糖脱支酶如GH62阿拉伯呋喃糖苷酶和GH115葡萄糖醛酸酶增加甚至揭示了两种Tt之前隐藏的木聚糖降解活性LPMO9s在木聚糖-PASC混合物上作为脱支木聚糖的纤维素吸附构象可能更容易被LPMO接近。
我们的研究结果表明，在自然界中，存在一系列生物质降解酶，并且在与纤维素的复合物中发现了木聚糖，一些AA9 LPMO可能不仅具有降解纤维素而且还降解木聚糖的高能力。本研究阐明了AA9 LPMO的高木聚糖分解能力及其功能相互作用以及复杂木质纤维素分解混合物的其他成分之间可能的协同作用。我们的研究为优化AA9 LPMO在未来木质纤维素分解混合物中的底物特异性铺平了道路，并为在未来生物材料的生产中利用木聚糖分解LPMO9开辟了可能性
TtLPMO9E和Tt LPMO9G都是异源生产、纯化和测试活性的。编码TtLPMO9E的基因及其天然信号肽和未附加标签被克隆到pPINK–GAP系统，并在毕赤酵母PichiaPink 菌株4中表达。在250 rpm和29 °C下，在5L带挡板摇瓶中的1L YPD中进行培养4天。使用离子交换色谱从培养上清液中纯化酶。TtLPMO9G基因被克隆到pPICZαA载体中，并在巴斯德毕赤酵母SMD1168H中表达。
表达菌株在5L带挡板摇瓶中的750mL BMMY培养基中生长5天，在时间点零补充1%甲醇和1%山梨糖醇，然后每24小时补充一次。该菌株的培养在200 rpm和30 °C下进行。TtLPMO9G基因包含一个C端His6标签，该蛋白质使用重力流IMAC进行纯化。使用 SDS-PAGE确认两种酶的纯度，并从A测定蛋白质浓度使用各自的理论消光系数进行280 次测量。纯酶通过0.22 µm Fisherbrand™无菌PES过滤器过滤，并在4°C下储存在50 mM BisTris-HCl缓冲液pH 6.5 中。
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体育大玩家No1
英格兰2-3不敌法国 卡塔尔世界杯1/4决赛 FIFA23精彩足球视频回放
06:22
想起了一件十多年前的往事，有一次帮客户的Java项目组升级框架。
入场之后屡次听到项目组的运维小哥抱怨war包过大，导致每次发布要等很久很久，用过WebSphere的童鞋可能知道我在说什么。
那么，这war有多大呢？
接近2G！！！？？？
富有求知欲的我于是下决心去研究下这鸽子，，不对，这war包为什么这么大？
草草一挖，果然就在里面发现了宝贝。
原来war包里还藏着两个程序安装包。
一个是JDK1.4；
另一个是PES，，，，是实....实况....况足球？！
根据SVN的提交记录，肇事的大哥很快就被找到了。
据说是在一个月黑风高的晚上，几个还在加班的码畜临时起意，决定一起找点乐子解解乏。这位带头大哥为了方便把自己的游戏分享给小伙伴，就想到了把它先提交到SVN上这样一个天才的主意。。。。当然，按照他原本的计划，这个文件应该是随后被删除的。。。可是，那晚他们玩得实在太尽兴了。。。。
没人会料到这个文件竟会悄无声息地溜进war包，一路潜伏到生产环境，然后反反复复的摩擦了可怜的WebSphere和运维小哥近一年。
4月27日单抽出了克圣，5月4日出了独狼，5月7日出了马儿，5月月14又出了坎贝尔[捂脸]。最近感觉欧皇护体了，终于心愿达成抽了克圣和坎贝尔，这下可以进入摸鱼
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